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使用分光光度計時須特別留意的6個方面

更新時間:2020-06-23      點擊次數(shù):2674

  可見分光光度計又叫紫外可見光譜儀,用來測量待測物質(zhì)對可見光或紫外光(200~760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器。可以測定核酸和蛋白的濃度,也可以測定細(xì)菌細(xì)胞密度。
    使用分光光度計時須特別留意的6個方面: 
    1、使用的吸收池必須潔凈,并注意配對使用。量瓶、移液吸管均應(yīng)校正、洗凈后使用。
    2、取吸收池時,手指應(yīng)拿毛玻璃面的兩側(cè),裝盛樣品以池體的4/5為度,使用揮發(fā)性溶液時應(yīng)加蓋,透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈,檢視應(yīng)無溶劑殘留。吸收池放入樣品室時應(yīng)注意方向相同。用后用溶劑或水沖洗干凈,晾干防塵保存。
    3、供試品溶液濃度除各該品種已有注明外,其吸收度以在0.3~0.7之間為宜。
    4、測定時除另有規(guī)定外,應(yīng)以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對照,采用1cm石英吸收池,在規(guī)定的吸收峰±2nm以內(nèi),測幾個點的吸收度或由儀器在規(guī)定的波長附近自動掃描測定,以核對供試品的吸收峰位置是否正確,并以吸收度大的波長作為測定波長,除另有規(guī)定外吸收度波長應(yīng)在該品種項下規(guī)定的測定波長±2nm以內(nèi)。
    5、供試品應(yīng)取2份,如為對照品比較法,對照品一般也應(yīng)取2份。平行操作,每份結(jié)果對平均值的偏差應(yīng)在±0.5%以內(nèi)。
    6、選用儀器的狹縫寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度,否則測得的吸收度值會偏低,狹縫寬度的選擇應(yīng)以減少狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn),對于大部分被測品種,可以使用2nm縫寬。

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