紫外可見(jiàn)分光光度計(jì),是實(shí)驗(yàn)室普及率很高的一款光譜儀器。按照光學(xué)構(gòu)造分,紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)可分為單光束和雙光束這兩類。
單光束:主要通過(guò)單束光進(jìn)行測(cè)量。一束給定波長(zhǎng)的光通過(guò)對(duì)照物,然后再通過(guò)實(shí)際樣品溶液,從而得到吸光結(jié)果。
雙光束:同一單色器發(fā)出的光,經(jīng)分光裝置分離出兩束光(1個(gè)參比光路,1個(gè)樣品光路,對(duì)應(yīng)2個(gè)接收器),分別測(cè)量對(duì)照樣品和實(shí)際樣品。
相較而言,雙光束紫外分光光度計(jì)可以消除參比和樣品比色皿之間的誤差和消除光源不穩(wěn)定、接收器靈敏度變化等因素的影響,特別適用于樣品結(jié)構(gòu)分析。
那么我們?cè)谶x擇雙光束紫外分光光度計(jì)時(shí)應(yīng)該考慮哪些因素呢?在選擇紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)時(shí),主要從:光度準(zhǔn)確度、雜散光、光譜帶寬、穩(wěn)定性、噪聲、波長(zhǎng)的準(zhǔn)確度和重復(fù)性這6方面進(jìn)行考量。
1、光度準(zhǔn)確度
光度準(zhǔn)確度指實(shí)際測(cè)量的光度讀數(shù)值與真值之差。它能直接反應(yīng)儀器測(cè)試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確程度,是用戶對(duì)儀器的直接要求。
2、雜散光
雜散光指的是遠(yuǎn)離吸收光的其它波長(zhǎng)的入射光。換句話說(shuō)就是,不應(yīng)該有光的地方有了光。它決定了儀器分析樣品的濃度范圍,特別是濃度的上限。
當(dāng)一臺(tái)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的雜散光一定時(shí),被分析的試樣濃度越大,其分析誤差就越大,它能使建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線彎曲,是光譜測(cè)量中誤差的主要來(lái)源。這個(gè)值當(dāng)然越小越好了。
3、光譜帶寬
光譜帶寬,指從單色器射出的單色光譜線強(qiáng)度輪廓曲線的1/2高度處的譜帶寬度。
按照比耳定律,光譜帶寬應(yīng)該是越小越好的。但是如果儀器的光源能量弱,光學(xué)傳感器的靈敏度低時(shí),光譜帶寬小了,也得不到理想的測(cè)量結(jié)果的。
所以,選擇和使用儀器時(shí)一定注意。
4、穩(wěn)定性
穩(wěn)定性是使用者最關(guān)注的指標(biāo)之一。儀器的宗旨是穩(wěn)定可靠,不穩(wěn)定更談不上可靠了。
5、噪聲
噪聲也是儀器的重要指標(biāo)之一。它主要影響或限制的是被測(cè)試樣濃度的下限。
6、波長(zhǎng)的準(zhǔn)確度和重復(fù)性
儀器的每個(gè)值都是在一定的波長(zhǎng)下測(cè)得的,如果所示的波長(zhǎng)和實(shí)際波長(zhǎng)偏差甚遠(yuǎn),那么測(cè)出的值和真值的吻合度從何談起呢?由此可見(jiàn)這個(gè)指標(biāo)的重要性。
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